Entfärbelösung nach GRAM

Die Entfärbelösung nach Gram ist ein wichtiger Bestandteil der Gram-Färbung, einer klassischen mikrobiologischen Färbemethode, die entwickelt wurde, um Bakterien in zwei Hauptgruppen einzuteilen: Gram-positive und Gram-negative. Die Unterscheidung basiert auf den Unterschieden in der Zellwandstruktur der Bakterien.

Die Entfärbelösung besteht typischerweise aus einer Mischung aus Isopropanol und Aceton. Die Entfärbelung ist ein kritischer Schritt in der Gram-Färbung, da sie die Farbstoffe aus den Gram-negativen Bakterien entfernt, während die Gram-positiven Bakterien ihre Färbung beibehalten.
Der Gram-Färbeprozess besteht aus mehreren Schritten:

1. Fixierung des Präparats auf dem Objektträger.
2. Färbung mit kristallvioletter Lösung, die sowohl Gram-positive als auch Gram-negative Bakterien färbt.
3. Behandlung mit Lugolscher Lösung (Jodlösung), die als Mordant wirkt und die Farbstoffbindung in den Bakterienzellen verstärkt.
4. Entfärben mit der Entfärbelösung nach Gram. Gram-positive Bakterien behalten ihre violette Farbe bei, während Gram-negative Bakterien entfärbt werden.
5. Gegenfärbung mit einer roten Farbstofflösung, wie Safranin. Die entfärbten Gram-negativen Bakterien nehmen diese Farbe an und erscheinen rot, während die Gram-positiven Bakterien violett bleiben.