WEIGERT Stammlösung A
Die Weigert-Stammlösung A besteht aus einer Mischung aus Hämatoxylin, Ethanol und Wasser. Die Weigert-Stammlösung B enthält eine Eisensalzlösung (z. B. Eisen(III)-chloridlösung), die als Oxidationsmittel dient. Um die Gebrauchslösung für die Weigert-Eisenhämatoxylin-Färbung herzustellen, werden die Stammlösungen A und B im Verhältnis 1:1 gemischt.
Die Mischung aus den beiden Stammlösungen A und B dient dazu, das Hämatoxylin auf das Gewebe aufzutragen und gleichzeitig die Eisenverbindungen als Oxidationsmittel zur Verfügung zu stellen, um die schwarz-braune Farbe des Hämatoxylin-Farbstoffs zu entwickeln. Diese Mischung wird auf das zu färbende Gewebe aufgetragen, um Zellkerne und andere basophile Strukturen selektiv zu färben.
Die Weigert-Eisenhämatoxylin-Färbung wird oft als Teil komplexerer Färbeverfahren eingesetzt, wie z. B. in der Trichrom-Färbung oder der Van Gieson-Färbung, um eine differenzierte Darstellung der verschiedenen Gewebekomponenten zu ermöglichen.
Art.-Nr.: 10225A
Färben von Zellkernen
Wichtige Hinweise
UN-Nummer: 1170
Warnhinweise:
Lagerung: 15 … 25 °C
Haltbarkeit: 24 Monate
Produktinformation
Wesentliche Bestandteile:
• Ethanol 99,0 % vergällt (MEK/IPA/BTX)
• Hämatoxylin (C.I.: 75290)
Gebrauchsanweisung
Gebrauchsanweisung / Protokoll / Anwendungsempfehlungen
Verwendung:
Weigert Eisenhämatoxylin wird für Zellkernfärbung für die Histologie und Zytologie eingesetzt. Die Kernfärbungen in Abstrichpräparaten, Dünnschichtpräparaten, Gefrierschnitten und Paraffinschnitten ergeben sehr stabile Ergebnisse, die keine zusätzliche Differenzierung benötigen. Das Eisenhämatoxylin wird sehr oft bei Trichromfärbungen eingesetzt, bei denen mit sauren Farbstofflösungen gegengefärbt wird, z.B. Masson Goldner Trichrom (Artikel-Nr.: 12043). Das Reagenz wird jedoch auch allein als Färbemittel zur Darstellung von Tonofibrillen, Gliafasern, Kernteilungsfiguren, Mitochondrien und Markscheiden eingesetzt. Die Färbelösung ist ausschließlich für die professionelle Anwendung als in-vitro Diagnostikum im histologischen Labor vorgesehen.
Prinzip:
Hämatoxylin ist ein Naturfarbstoff, der aus dem Blauholzbaum(Haematoxylum campechianum) durch Extraktion gewonnen wird. Grundlage der Hämalaun-Färbung ist zunächst eine Oxidation des Hämatoxylin zu Hämatein. Durch Zugabe von Metallsalzen (EisenIII-chlorid) kommt es zu einer Komplexbildung der Metallionen mit dem Hämatein. Es entsteht ein Hämatoxylinlack, der stark positiv geladen ist. Gefärbt wird in saurer Lösung. Die Kernfärbung mit Weigert Eisenhämatoxylin ist besonders stabil bei Gegenfärbungen mit sauren Farbstofflösungen, z.B. Bindegewebsdarstellung mit Masson Goldner Trichrom (Artikel-Nr.: 12043).
Verfahren:
Beispiel für eine Weigert Eisenhämatoxylinfärbung: (1)Schnitte entparaffinieren (2) Schnitte mit absteigender Alkoholreihe rehydratisieren (3)Weigert Eisenämatoxylin (Gebrauchslsg.) 15 min (4) Aqua dest. 15 sec (5) Fliessend Wässern8 min (6) Entwässern mit aufsteigender Alkoholreihe (7) Klären mit Xylol, eindecken Beispiel für eine Masson Goldner Trichromfärbung: (1)Schnitte entparaffinieren (2) Schnitte mit absteigender Alkoholreihe rehydratisieren (3)Weigert Eisenämatoxylin (Gebrauchslsg.) 15 min (4) Aqua dest. 15 sec (5) Fliessend Wässern8 min (6) Säurefuchsin-Ponceau-Azophloxin4 min (7) Essigsäure 1%ig30 sec (8) Phosphormolybdänsäure Orange G 30 min (9) Essigsäure 1%ig30 sec (10)Lichtgrün-Goldner III 6 min (11) Essigsäure 1%ig 2 min (12) Fliessend Wässern 1 min (8) Entwässern mit aufsteigender Alkoholreihe (9) Klären mit Xylol, eindecken Die Kernfärbung mit Weigert Eisenhämatoxylin ist abhängig dem Härtegrad des Leitungswassers und dem Oxidationszustands des Hämatoxylin. Das Färbeergebnis kann von blau-schwarz bis braun variieren. Jedes Labor sollte eine eigene Arbeitsanweisung für ein Färbeprotokoll erstellen, die sich an den Gegebenheit des Labors und den jeweils zu bearbeitenden Fragestellungen des Anwenders orientieren. Weitere mögliche Verwendungen der Komponente wurden im Rahmen der Leistungsbewertung nicht getestet. Empfehlung: Eventuell auftretende Niederschläge oder Ausfällungen bei häufiger Anwendung können durch Filtration über übliche Faltenfilter beseitigt werden. Haltbarkeitstest: Einige Tropfen auf Filterpapier geben, werden diese violett ist die Färbung noch in Ordnung, bleiben sie braun, ist die Färbung verbraucht.
Leistung:
Erwartete Ergebnisse: Zellkerne:blau-schwarz bis braun Das Zellplasma weist Färbungen auf, die von der verwendeten Gegenfärbung abhängig sind. Beispiel Masson Goldner Trichrom: Zytoplasma:rot Muskulatur:ziegelrot Kollagenes Bindegewebe:grün Erythrozyten:orangerot
Gefahren- und Sicherheitshinweise
Signalwort 1: Gefahr |
Signalwort 2: flamme, exclam, , |
Warnhinweise: |
Gefahrenhinweise: 225 Flüssigkeit und Dampf leicht entzündbar. 319 Verursacht schwere Augenreizung. Sicherheitshinweise: 210 Von Hitze, heißen Oberflächen, Funken, offenen Flammen sowie anderen Zündquellen fernhalten. Nicht rauchen. 233 Behälter dicht verschlossen halten. 280 Schutzhandschuhe/Schutzkleidung/Augenschutz/Gesichtsschutz tragen. 337 313 Bei anhaltender Augenreizung: Ärztlichen Rat einholen/ärztliche Hilfe hinzuziehen. |
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